本发明公开了一种UHPLC‑MS‑MS测定水翁花中熊果酸的方法，其包括以下步骤：取水翁花药材粉末，加入甲醇，超声处理，加甲醇补足减失重量，过滤，取续滤液加甲醇定容，即得供试品溶液；取熊果酸对照品，加甲醇溶解并定容，即得对照品溶液；取对照品溶液制成不同浓度的熊果酸标准溶液，注入高效液相色谱‑质谱联用仪中分析，以进样浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，得到标准曲线，将供试品溶液注入高效液相色谱‑质谱联用仪中，测得供试品溶液的峰面积，计算得出熊果酸的含量。本发明采用UHPLC检测方法，操作简单快速，稳定可靠，灵敏度和重复性良好，具有较高的精密度，大大缩短了检测时间，便于对水翁花中熊果酸进行定量检测。