本发明提供一种高效液相色谱法测定阿奇霉素胶囊中有关物质的方法，该方法采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，流动相A：0.05mol/L磷酸氢二钾溶液：乙腈＝97‑99：1‑3，其中，0.05mol/L磷酸氢二钾溶液用20％磷酸溶液调节pH值至8.2；流动相B：乙腈；柱温：20‑35℃；检测波长：205nm‑215nm；流速：0.8‑1.1mL/min；采用梯度洗脱等色谱条件进行检测，该方法专属性好、分析速度快、重现性高，可用于准确、灵敏的检测出阿奇霉素胶囊15个已知杂质与其他未知杂质，有关物质色谱条件明显优于国内外药典方法。