本发明涉及一种免疫缺陷大鼠动物模型的构建方法及应用，分别构建大鼠Rag1基因第2外显子、Rag2基因第3外显子、Il2rg基因第1外显子的sgRNA的表达载体，通过体外转录表达，获得同时敲除了Rag1基因和Rag2基因的大鼠，获得Il2rg基因被敲除的大鼠，杂交获得Rag1、Rag2和Il2rg基因均被敲除的大鼠。本发明方法构建的大鼠SD‑RG具有免疫缺陷的表型，方便进行多种肿瘤的移植，并支持其快速生长，可以广泛应用于人源化动物模型、干细胞和肿瘤研究等多种领域。