本发明属于生物医药领域，涉及一种细菌分离培养方法，具体涉及一种幽门螺杆菌菌株分离培养的方法。在本方法的样本转运过程中，将疑似含有幽门螺杆菌的样本保存于运送液中；所述运送液包括布氏肉汤培养基、吸附剂、还原剂和幽门螺杆菌脂多糖提取物。其中，幽门螺杆菌脂多糖提取物对杂菌具有抑制作用, 对幽门螺杆菌菌体具有保护作用。本发明方法可延长样本转运至细菌培养研究单位的转运时间并保持幽门螺杆菌活性，从而降低野生型幽门螺杆菌菌株分离培养难度并提高细菌培养的阳性率。本发明的幽门螺杆菌培养方法可以应用到细菌分型、致病机制研究、构建动物模型及确定致病因子等研究中。