本发明一种强心苷类化合物及其制备方法与应用，所述强心苷类化合物14β‑羟基‑5β，14β‑强心甾‑8, 16, 20(22)‑三烯‑3‑O‑β‑D‑地芰糖苷是通过从欧洲夹竹桃中分离提取而发现的新的强心苷类化合物，采用冷浸提取、大孔树脂柱色谱、硅胶柱色谱、ODS柱色谱、凝胶柱色谱、制备型高效液相等方法成功分离得到，具有抗肿瘤作用，所述化合物可以作为其他化合物的先导物，以及新药开发和药理活性研究的原料，亦可用于制备抗肿瘤的药物。