本发明涉及一种利福平胶囊中利福平及其杂质的含量测定方法，所述方法包括以下步骤：1)，对照品溶液的配制：精密称取利福平对照品适量，约10mg加1ml乙腈溶解；精密称取醌式利福平对照品与N‑氧化利福平对照品各适量，各约10mg加1ml乙腈使溶解；2)，供试品溶液的配制：取利福平胶囊内容物适量，精密称定，约10mg利福平加1ml乙腈溶解；3)，测定法：精密量取利福平对照品溶液与供试品溶液各5μl，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图，根据色谱图，采用峰面积法计算利福平胶囊内容物中利福平以及醌式利福平，N‑氧化利福平的含量。