本发明属于生物医药领域，具体而言涉及一种标记特异性高亲和力重组抗体的荧光微球及其制备方法与应用，特别是一种快速定量检测人尿样或血样中KIM‑1、NGAL、IGFBP7、TIMP‑2、IL‑18、PCT、cTnI的即插荧光检测卡。本发明提供的标记特异性高亲和力重组抗体的荧光微球的方法，具体为先对荧光微球活化；然后将活化的荧光微球放入装有磷酸缓冲液的透析袋中得到透析后的荧光微球液；加入氨基聚乙二醇羧基，二次透析后的荧光微球液再进行进一步活化，并用重组抗体标记，反应后离心，清洗沉淀，再重悬沉淀。本发明提供的荧光微球，能够显著提高免疫荧光的反应下线，使得制得的检测卡比传统方法灵敏度提高10‑100倍, 检测范围也得到显著提升。