本发明公开了一种酶活及热稳定性改善的凝乳酶突变体，属于酶工程技术领域。本发明用谷氨酰胺替换凝乳酶第75位亮氨酸，用苏氨酸替换第222位蛋氨酸，并对上述位点的氨基酸进行双突变构建凝乳酶突变体，将突变体在毕赤酵母GS115中异源表达，对表达的粗酶液进行凝乳酶活，蛋白酶活，耐热性检测。双突变体Leu75Gln‑Met222Thr的粗酶液凝乳酶活达到28.0SU/mL，C/P值达到11.7，相比出发菌株P‑cMCE的凝乳酶活和C/P值提升了155.6％及195.0％。45℃恒温半小时的热稳定性降低了13.6％。