本发明提供一种以LINE‑1 ORF1蛋白为靶点的抗癌药物筛选模型及筛选方法。所述药物筛选模型为高表达LINE‑1 ORF1的乳腺癌细胞T47D。本发明采用In‑Cell Western法对加入化合物后细胞中LINE‑1 ORF1蛋白的表达量进行检测，建立了一种简便、灵敏、稳定的定量分析LINE‑1 ORF1蛋白表达量的检测方法，进而验证了其作为LINE‑1 ORF1蛋白抑制剂和激动剂高通量筛选体系的可能性。利用本发明的筛选模型已成功获得多个靶向肿瘤细胞LINE‑1 ORF1蛋白的抑制剂，为抗肿瘤药物的研发提供新手段。