本发明公开了一种超临界萃取分离蜘蛛香挥发油与非挥发性成分的方法，包括：A、对蜘蛛香原药材除杂、干燥、粉碎，不需过筛；B、对粗粉进行超临界萃取，对药材中挥发油与非挥发性混合物进行萃取后转入一级分离罐；C、一级分离罐中降低温度和压力但仍保持二氧化碳超临界状态，被萃取出来的非挥发性混合物分离，挥发油溶于超临界二氧化碳中进入二级分离罐；D、降低压力和温度，使得二氧化碳从超临界状态变为普通气态，分离出挥发油，实验挥发油与非挥发性混合物的完全分离。本方法温度低、时间短、成本低、操作简单、收率高，分离度好，未使用任何夹带剂，不对蜘蛛香中任何成分产生影响，能最佳保证药材药效，本方法产品易于后期继续加工。