本发明公开了一种N‑吡啶脲基壳聚糖季铵盐制备方法和应用。以壳聚糖、氯甲酸甲酯、氨基吡啶、碘甲烷为原料，先制备N‑甲氧羰基壳聚糖，所得N‑甲氧羰基壳聚糖再与氨基吡啶反应，所得N‑吡啶脲基壳聚糖与碘甲烷反应后经过纯化得到N‑吡啶脲基壳聚糖季铵盐。制备的N‑吡啶脲基壳聚糖季铵盐可应用于制备抗氧化剂，可广泛用于生物、医药、食品、化工等领域，其生物活性如抗氧化活性得以提高，制备原料易得，制备简单、条件温和，为高值化壳聚糖的应用开发奠定了基础。