本发明属于生物医药技术领域，公开了一种MSTN纳米抗体、构建方法及其应用，构建绵羊MSTN基因表达产物的纳米抗体文库；通过噬菌体展示技术得到针对MSTN基因表达产物特异性纳米抗体；构建双价绵羊MSTN纳米抗体。本发明提供的MSTN纳米抗体在小鼠上的作用体现为增加动物肌肉含量，降低动物脂肪含量。当增重以肌肉增重为主时，绵羊MSTN纳米抗体体现为增重超过未处理的对照组；小鼠显示纳米抗体组肌肉重量明显超过对照组，肌肉占全身的比例也显著超过对照组。绵羊MSTN纳米抗体可以促进动物肌肉生长。