本发明公开了一种抗CD33嵌合抗原受体、编码基因、重组表达载体及其构建方法和应用。该抗CD33嵌合抗原受体包括依次串联的CD8leader嵌合受体信号肽、CD33单链抗体重链VL、Optimal Linker C、CD33单链抗体轻链VH、CD8Hinge嵌合受体铰链、CD8Transmembrane嵌合受体跨膜区、CD137嵌合受体共刺激因子，以及TCR嵌合受体T细胞激活域。此外，还公开了该抗CD33嵌合抗原受体的编码基因、重组表达载体及其构建方法和应用。本发明能显著提高细胞因子的分泌、CAR‑T细胞的体外杀伤作用，且临床治疗效果突出。