本发明提供了一种sgRNA或PTG(Polycistronic tRNA‑gRNA)，结合CRISPR‑Cas9技术可以敲除T细胞抗原受体(TCR)，或者主要组织相容性复合体(MHCⅠ)及免疫抑制分子相关基因中的一个或多个。本发明还提供了一种表达嵌合抗原受体(CAR)，且不表达TCR的通用型CAR‑T细胞及其制备方法。本发明制备得到的通用型CAR‑T细胞适用异种受体，具有通用性，同时具有更强的杀伤力。