本发明公开了一种生产α‑酮戊二酸的双酶共表达菌株的构建方法，属于发酵工程和酶工程技术领域。本发明在分析L‑谷氨酸生产α‑酮戊二酸的基础上，分析转化体系所需KatG用量；随后从转录水平和翻译水平共构建了不同表达水平的双酶共表达菌株，并通过摇瓶水平全细胞转化L‑谷氨酸生产α‑酮戊二酸来评价共表达菌株性能，转化条件为：110g/L L‑谷氨酸，2～2.5g/L菌体，pH 6.5磷酸缓冲液体系，30℃，200rpm条件下转化18～24h。其中，最优菌株F006α‑酮戊二酸产量可以达到107.2g/L，转化率为98.4％，完全替代外源添加过氧化氢酶；增加菌体浓度，132g/L底物条件下α‑酮戊二酸的产量可以达到127.1g/L，转化率96.9％。