一种SYBR Green衍生物及其在细胞线粒体DNA荧光成像中的应用，涉及细胞生物学领域，所述SYBR Green衍生物是通过对SYBR Green原料烷基化修饰得到的季铵盐产物；所述SYBR Green衍生物的修饰剂包括亲电试剂或连接有亲电取代基的功能分子。所述SYBR Green衍生物作为荧光探针在细胞线粒体DNA荧光成像中的应用，该类探针能够准确定位于活细胞的线粒体DNA中进行实时成像并反映线粒体的电势。