本发明提供一种成像探针，包括靶向识别单元、酶水解底物单元、自组装单元和信号分子，所述酶水解底物单元为含有功能酶底物的多肽序列，所述多肽序列为PLGYLG或GPA，所述靶向识别单元、酶水解底物单元和自组装单元通过酰胺键依次相连，所述信号分子与自组装单元相连。本发明提供的成像探针具有肿瘤靶向功能和组装功能，同时所述成像探针能够通过酶水解底物单元在肿瘤病灶部位与肿瘤微环境中高表达的酶发生高效酶切反应，进而自组装形成特定纳米纤维，实现长效滞留，显著提高了肾、肝和膀胱等器官肿瘤的信噪比，为器官肿瘤的术中导航切除提供了新的方法。