本发明提供了一种TEM1特异性核磁探针，其包括通过交联剂连接的抗TEM1单链抗体和氨基化的SPIO纳米颗粒，其中，所述氨基化的SPIO纳米颗粒通过酰胺键与交联剂连接，所述抗TEM1单链抗体的C末端为半胱氨酸，并通过硫醚键与交联剂连接。本发明还提供了一种TEM1特异性核磁探针的制备方法，TEM1特异性核磁探针在制备诊断卵巢癌的试剂中的用途以及包含该TEM1特异性核磁探针的试剂盒。本发明提供的TEM1特异性核磁探针特异性好，灵敏度高，无细胞毒性，在血清中易于清除，并且免疫原性较小，在体内不易引发特异性反应；另外，抗体分子量较小使其易进入实体瘤周边，并且与受体的结合效率很高，能够获得足够的影像对比度。