本发明公开了一种具有免疫活性的白及多糖及其制备方法与应用。采用果胶酶酶解法提取制备具有免疫活性的白及白糖，提取工艺条件为：酶添加量0.5‑2％，酶解温度：35‑60℃，酶解时间：50‑100min，pH值为：4‑7。在该酶解条件下白及多糖得率为58.32％；通过本发明制备的白及多糖对DPPH自由基、OH自由基和ABTS+自由基的清除率分别可达到43.6％、74.8％、51.7％，对Raw264.7细胞生长有一定的促进作用，具有免疫调节活性，其浓度为400μg/mL时免疫诱导活性效果显著。本发明制备的白及多糖可应用到免疫增强药物或增强免疫力的保健食品的开发中，为白及多糖在食品和医药领域的开发利用及工业化生产提供理论基础。