本发明涉及一种DNA/RNA合成用无水乙腈的制备方法，方法步骤包括：利用活性炭纤维吸附柱吸附除杂；通过紫外光催化氧化技术将乙腈样品中的杂质氧化分解；再利用氢氧化钠碱性吸附柱吸附除去氢氰酸以及被氧化后产生的酸类杂质；通过改性的SBA‑15分子筛吸附除去金属离子杂质；利用3A分子筛干燥脱水；通过蒸馏、减压萃取精馏、加压步骤得到乙腈产品。本发明制得的高纯无水乙腈含水量小于20ppm，可以满足DNA/RNA合成用高纯无水乙腈客户在科研试验中的应用需求，降低了对国外试剂的依赖性，为复杂药物的分离及定性提供了优质试剂。