本发明公开了一种FAdV‑4TaqMan MGB的荧光定量PCR检测试剂及其制备方法和应用，包括1对特异性引物对和1条荧光探针；特异性引物对的核苷酸序列SEQ ID NO.1～2，荧光探针的核苷酸序列SEQ ID NO.3。本发明的禽腺病毒Ι亚群C种第4血清型病毒(FAdV‑4)TaqMan MGB荧光定量PCR检测引物和探针，以及基于所述引物和探针建立FQ‑PCR检测方法具有快速、特异、敏感、高通量等优点，可在1～2h内完成检测，能满足大批量、快速检测禽腺病毒Ι亚群C种第4血清型病毒的要求；为禽腺病毒的快速检测、传染源调查、传播环境、病原追溯提供了有效工具，对该病的防控具有重要意义。