本发明公开了一种爬山虎叶固化水体脱氮微生物制剂的制备方法，属于微生物制剂制备领域。本发明微生物制剂是取爬山虎树叶处理得碎叶备用，取甘露醇、胰蛋白胨、淀粉和琼脂制得微生物培养基，将处理后的池塘污泥置于培养基中培养，与无菌水混合过滤得滤液接种至微生物培养基上，添加营养液反复培养，与无菌水混合过滤得滤液，离心分离后得脱氮生物菌种，再与备用的爬山虎碎叶屑、甘油和脱脂乳混合，经烘干过筛制得。本发明的有益效果是：本发明制得的微生物制剂性状稳定，有效活菌数多，易保存，保存期为10～18个月；制备方法简单，成本低，处理时耗时短，脱氮率达92%以上，值得推广与使用。