本发明提供了一种冬凌草活性成分组合物的制备及应用，该组合物由冬凌草甲素、冬凌草乙素、迷迭香酸、阿魏酸和槲皮素组成；所述的冬凌草甲素、冬凌草乙素、迷迭香酸、阿魏酸和槲皮素的重量比为(3‑10) : (1‑3) : (1‑4) : (1‑4) : (2‑6)。该组合物中各活性成分能够产生协同作用，从而有效治疗NAFLD。