本发明公开了一种自噬关键蛋白ATG4B酶抑制剂及其应用，属医药技术领域。该抑制剂结构通式如(1)所示，其中，R1，R2为单取代、双取代或多取代，取代基独立选自H、卤素、‑CF3、‑CN、‑NO2、‑OH、‑NH2、‑L‑C1‑C6的烷基、‑L‑C1‑C6的烯基、‑L‑取代或非取代的杂芳基、或‑L‑取代或非取代的芳基，其中L是键、O、S、‑S(＝O)、‑S(＝O)2、NH、C(O)、CH2、‑NHC(O)O、‑HC(O)或‑C(O)NH中的一种或多种。该抑制剂可以通过特异性的抑制ATG4B活性，降低细胞自噬水平，进而发挥阻止肿瘤细胞生长的作用，实现其作为抗肿瘤药物的应用。