本发明属于一种甾体激素制备技术领域，具体是涉及到一种甾体中间体1, 2位脱氢的方法，包括如下步骤，用诺卡氏菌对纯度为98％以上的底物精品进行转化，当转化率达到90％以上，且产物的晶型呈柱状或针状时，投入底物粗品，继续转化，得到发酵液，然后过滤，浓缩，干燥，得产物；所述底物为16α‑甲基‑雄甾‑4, 9(11)‑二烯‑3, 17‑二酮，所述产物为16α‑甲基‑雄甾‑1, 4, 9(11)‑三烯‑3, 17‑二酮，本发明得到的产物的晶型符合要求，在原料杂质多的情况下，底物转化率高，得到的产物纯度和收率高。