本发明涉及氨基葡萄糖的制备方法，尤其涉及通过体外酶催化制备氨基葡萄糖的方法，属于氨基葡萄糖的酶催化制备领域。所述方法包括：采用6‑磷酸氨基葡萄糖脱氨酶(glucosamine‑6‑phosphate deaminase，EC 3.5.99.6，GlmD)催化，将6‑磷酸果糖(F6P)和铵盐转化为6‑磷酸氨基葡萄糖(GlcN6P)；和采用能够脱磷酸基团的酶催化GlcN6P脱磷酸基团生成氨基葡萄糖(GlcN)。