专利名称 | 一种人源程序性细胞死亡因子受体蛋白-1及其生产方法和应用 | ||
申请号 | CN201910859265.X | 申请日 | |
公开(公告)号 | CN110713545A | 公开(公告)日 | |
申请(专利权)人 | 潍坊医学院; 山东宽和正生物医药有限公司 | 发明人 | 董金华; 董航; 魏小源; 单喜军; 黄小明; 李鑫钰 |
专利来源 | 国家知识产权局 | 转化方式 | |
摘要 |
本发明公开了一种人源程序性细胞死亡因子受体蛋白‑1及其生产方法和用途,该蛋白含有一个附加的半胱氨酸标签用于功能性分子的标记,含有一个组氨酸标签用于蛋白的纯化,编码该蛋白的基因具有针对原核细胞表达优化的序列;生产方法为先将hPD‑1细胞外氨基酸的基因进行优化,利用PCR将优化的hPD‑1基因扩增后克隆到蛋白表达质粒,构建了hPD‑1原核表达载体;在大肠杆菌细胞内表达hPD‑1并利用组氨酸标签进行纯化,最后使用变性剂进行溶解,透析以对其进行复性,获得重组hPD‑1蛋白质,利用酶联免疫吸附试验验证蛋白质的活性。本发明所公开的hPD‑1生产方法工艺简单易行,所生产的hPD‑1蛋白质成本低,将为hPD‑1单克隆抗体的开发及进一步研发免疫检测技术和抗体医药提供重要工具。 |
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