一种高催化效率且耐高温木聚糖酶突变体及其制备方法和应用，涉及基因工程和遗传工程领域。本发明以来源于丝状真菌Bispora sp.MEY‑1的GH10家族木聚糖酶XYL10C为母本，采用分子生物学技术将母本中第175位的E位点进行饱和突变，结果发现，突变体XYL10C‑CutN、E175H、E175N、E175D、E175V、E175L、E175Q、E175M八个突变体的催化效率和比活较野生酶有大幅度提高，通过饱和突变发现研究该点在XYL10C高比活和高催化效率中所扮演的重要角色，此方法对木聚糖酶酶及其它(α/β)8桶状酶的高效催化机制的研究具有重要的指导意义。