本发明公开了一株乳酸胁迫抗性提高的大肠杆菌，属于微生物工程技术领域。本发明以提高大肠杆菌对D‑乳酸胁迫抗性为目的，以适应性进化为方法，筛选得到了一株可广泛应用于制备食品、药品、饲料以及化学品发酵生产的大肠杆菌，筛选得到的菌株Escherichia coli DLA3胁迫4h后，存活率较出发菌株提高了249.0倍。