本发明涉及基于四氧化三铁制备的多肽靶向的磁性纳米探针及其应用，纳米探针由以下方法制备得到：(1)取柠檬酸铁和硫酸亚铁配成溶液，调节pH，水热反应，分离干燥；(2)将四氧化三铁纳米颗粒与PEG混合，加入EDC和NHS活化，再加入硼酸盐缓冲溶液，保持pH为7‑10，室温反应；(3)取PAMAM与Fe3O4‑PEG混合均匀，加入EDC和NHS活化，再加入硼酸盐缓冲溶液，保持pH为7‑10，反应，接着再加入MMP2，继续反应；(4)取光敏剂和Fe3O4‑PEG‑PAMAM‑MMP2的溶液混合，避光震荡处理，透析纯化后，得到磁性纳米探针，即为目的产物。与现有技术相比，本发明制备流程简单，操作方便，在肿瘤成像和个性化治疗上具有广阔的应用前景。