本发明公开了一种嗜酸乳杆菌高密度液体培养方法，包括以下步骤：将嗜酸乳杆菌经过三角瓶培养基以及种子罐培养基扩繁后进入发酵罐，发酵18h，培养温度为35℃，搅拌转速200rpm，pH采用2mol/L的NaOH通过种子罐补碱泵自动控制在7.3，并且通入氮气与氢气的混合气体(氮气体积/氢气体积＝10：1)维持发酵罐压力0.05MPa，期间每隔30min取样一次并检查葡萄糖残余浓度，通过发酵罐上的补料泵补充葡萄糖维持发酵罐内葡萄糖浓度2g/L。本发明方法通过控制葡萄糖浓度来协调菌体生长，并且合适的pH值与还原性气体氢气的浓度，有效的提高了嗜酸乳杆菌的培养浓度。