一种可限制激活CRISPR/Cas13a的双锁纳米粒子的制备方法和应用，这种纳米颗粒(DLNP)只能在肿瘤组织中限制CRISPR/Cas13a的激活，以进行有效的癌症免疫治疗。DLNP设计为核‑壳结构，其中CRISPR/Cas13a封装在核内，被一层双响应聚合物网络覆盖。在聚乙二醇外壳的保护作用下，DLNP表现出血液循环稳定性。在低pH和高H2O2的肿瘤微环境中，DLNP选择性将CRISPR/Cas13a释放。使用这种双锁纳米颗粒，在小鼠中观察到有效的肿瘤生长抑制作用，无明显副作用。由于CRISPR/Cas13a的临床应用主要受到不可控激活所带来毒副作用限制，因此这种双锁纳米粒子为精确控制CRISPR/Cas13a的激活及在有效癌症治疗中的应用提供了一种可行的方法。