本发明公开了一种鸭脚罗伞叶生物碱的富集方法，包括以下加工步骤：S1、以干燥的鸭脚罗伞叶为原料，加入pH 1.0~2.0的含酸的乙醇水溶液浸泡；S2、浸泡液减压浓缩后用弱酸性阳离子交换吸附，用水洗涤树脂，再以40~60%的乙醇洗脱树脂，收集洗脱液；S3、洗脱液调节pH，浓缩，并以大孔树脂吸附，以乙醇‑水体系梯度洗脱除杂；S4、以调节过pH的乙醇‑水体系继续洗脱，收集洗脱液，浓缩，调节pH后，静置，过滤，得到沉淀物总碱。本发明综合利用离子交换树脂与大孔树脂分离技术，根据鸭脚罗伞的生物碱类别，通过对树脂上样洗脱中各项等关键点的优化选择得到较高含量特征生物碱的鸭脚罗伞提取物。