本发明提供荧光溶解氧传感器膜片的制备方法，所述方法包括：将聚氯乙烯粉、邻苯二甲酸二异辛脂和四氢呋喃按5g：8g：100ml混合，在超声机中超声混合均匀，在所述载体基片的中心区域上丝网印刷成膜，烘干；将负载有荧光指示剂的固体颗粒、萘酚和有机易挥发溶剂按1g：1ml：100ml混合，超声分散均匀，超声波喷涂在所述透明层表面，烘干；将聚二甲基硅氧烷、正硅酸乙酯、二月桂酸二丁基锡、曲拉通X‑100、炭黑以20 : 4 : 1 : 1 : 1质量比例均匀混合后，丝网印刷涂覆于荧光层表面，烘干；将金属粉末、萘酚超声和甲苯按1g : 1ml：200ml均匀混合，将其超声波喷涂在荧光保护层表面，烘干。本发明提供的荧光溶解氧传感器膜片及其制备方法，可改善荧光膜材料的荧光特性、稳定性和加工性。