本发明涉及一种通过靶向高通量测序技术检测诊断青少年发病的成人型糖尿病致病基因的DNA文库及其应用，该文库包括14个青少年发病的成人型糖尿病的致病基因。本发明优选14个青少年发病的成人型糖尿病致病基因，设计探针池，建立针对14个青少年发病的成人型糖尿病致病基因的目标区域文库，文库利用高通量测序技术进行测序，寻找致病突变，为临床诊断提供遗传学和分子生物学依据。本发明具有准确、快速、灵活、低成本的特点，本发明涉及的14个基因为目前已知的青少年发病的成人型糖尿病1型至14型的致病基因，对青少年发病的成人型糖尿病的诊断、鉴别诊断和精准治疗有着重要的意义和临床价值。