本发明属于功能性生物纳米材料技术领域，涉及一种基于碳量子点构建的酪氨酸酶检测探针CQD‑L及其制备方法和应用。该发明利用碳量子点荧光能够被酪氨酸酶与酪氨酸酯类衍生物反应生成的苯醌类物质淬灭的原理，用EDC/NHS将酪氨酸酯类衍生物与碳量子点结合制备成CQD‑L。将CQD‑L应用于酪氨酸酶的检测，该探针能够特异性识别酪氨酸酶，且探针的荧光淬灭程度与酪氨酸酶的活性在一定范围内成线性关系，可以敏感地检测酪氨酸酶的活性。本发明所述的检测探针制备简单、经济性强，发明的检测方法灵敏度高、易于推广和应用。