本发明公开了一种氧化水解酶基因及其编码的氧化水解酶的制备与应用。本发明所涉及的氧化水解酶BtLPMO10A基因来源于苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种(ACCC 10066)。本发明还提供了一种制备氧化水解酶BtLPMO10A的方法，即利用基因工程的技术方法，将该酶的基因克隆到大肠杆菌表达载体上，获得可表达该酶的大肠杆菌重组菌株，用该工程菌株表达制备的氧化水解酶BtLPMO10A对不溶性几丁质具有较强的结合能力，可氧化水解多糖物质产生具有不同聚合度的糖酸。本发明提供的氧化水解酶BtLPMO10A可辅助多糖水解酶，提高多糖的水解效率。