本发明公开一种促进创伤再生修复的细胞因子制剂的制备方法，包括以下步骤：S1、肌腱干细胞培养液的制备；S2、肌腱干细胞的制备；S3、初代肌腱干细胞获得；S4、肌腱干细胞培养；S5、肌腱干细胞获得。通过肌腱干细胞的制备采用的直接剪切方式获得，然后置于消化液中消化获得单细胞避免过多的单细胞聚集，获得的单细胞单独培养以便减少多细胞聚集造成其他局部组分吸收不充分，这种细胞在培养时吸收营养不充分极易导致分化现象，影响细胞的增殖速率，离心后获得的富血小板血浆中含有大量的生长因子，可直接被应用。