本发明涉及茶油深加工技术领域，尤其是一种茶油提取物的制备方法及应用。茶油提取物的制备包括：(1)粉碎；(2)一次浸提：将茶籽粉与有机酸提取液混合提取，得浸提液A和滤渣A；(3)二次浸提：将滤渣A与生物碱提取液混合提取，制得浸提液B和滤渣B；(4)复合发酵处理：取滤渣B，加入菌液1发酵，制得初发酵物；将初发酵物与制备有机酸提取液、生物碱提取液后的药渣混合，加入菌液2发酵，制得复合发酵物；(5)提取：向复合发酵物中加入乙醇提取，得提取液；(6)混合。本发明提供的茶油提取物，富含角鲨烯、茶皂素、生物碱等活性物质，稳定好，生物相容性好；可用于制备修复毛鳞片、增强头发韧性的护发素。