本发明涉及一种具有树枝状结构的细菌纤维膜及其制备方法，方法为：将等电点为3.5～4的菌株均匀分散在pH值为4.0～6.0的菌株培养液中得到菌株细胞密度为105～108个/mL的培养菌液，然后将培养菌液置于表面静态水接触角为65～85°的表面亲水的培养容器中静置培养得到具有树枝状结构的细菌纤维膜，细菌纤维膜主要由主干细菌纤维素纤维和分支细菌纤维素纤维构成，主干细菌纤维素纤维自身之间相互交联形成三维网孔结构并构成细菌纤维膜的骨架，分支细菌纤维素纤维在主干细菌纤维素纤维上悬臂生长。本发明方法操作方便，绿色无污染，制得的细菌纤维膜具有生物相容性好、比表面积高、阻隔和吸附性能好等优点。