本发明涉及一种铜席夫碱配合物及其制备方法和应用，目的是解决现有的铜席夫碱配合物制备方法中存在的操作繁琐、反应时间长、产率低以及存在安全隐患的技术问题，本发明的一种铜席夫碱配合物，其分子式为[Cu2(HL)2(OAc)2]n，其中HL为肼基‑(2‑吡啶基)水杨醛亚胺；本发明铜席夫碱配合物的制备方法，将摩尔比为1 : 2 : 2的Cu(OAc)2·H2O、2‑肼基吡啶和水杨醛，加入含有甲醇的聚四氟乙烯管中, 所述Cu(OAc)2·H2O与甲醇的摩尔体积比为0.1：(3‑5)mmol/ml；在80‑100℃下反应48‑72h，自然降温，析出黑色棒状晶体，用甲醇溶液洗涤后干燥，即制得所述铜席夫碱配合物。本发明的铜配合物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及枯草芽孢杆菌具有强的抑菌作用，在生物活性领域有优良的潜在应用前景，可作为新型抗菌剂。