本发明公开了当归四逆汤抗寒凝血瘀证差异代谢物代谢通路及研究方法，包括：采用超高效液相色谱串联质谱检测分析冰水浴加肾上腺素诱导雌性大鼠形成寒凝血瘀证及当归四逆汤干预后的不同时间点变化的内源性代谢产物，获得指纹图谱；利用多元变量统计分析方法，从多个变量中筛选并鉴定出21个显著发生变化的代谢物；通过metaboanalyst开源在线代谢组学分析网站，富集出与寒凝血瘀证不同发展时期相关的八条代谢通路。本发明利用动态分析的方法研究寒凝血瘀证发生发展过程及当归四逆汤治疗过程中相关的代谢变化，有助于揭示在不同时间点的疾病发生发展机制，以及阐明治疗过程中药物所调控的异常代谢网络。