本发明属于医药检测领域，公开了一种乙酰半胱氨酸液体制剂中依地酸二钠的含量测定方法。该方法采用HPLC法，以乙酰半胱氨酸液体制剂、环糊精和/或环糊精衍生物、Fe3+和流动相制备供试品溶液，以氨基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以离子对缓冲液与有机相的混合溶剂作为流动相，测定上述供试品溶液中依地酸二钠的含量。该方法操作简单、重复性良好，能够准确测定乙酰半胱氨酸液体制剂中依地酸二钠的含量，从而能够更好地控制乙酰半胱氨酸液体制剂的产品质量。