本发明提供了一种电化学免疫传感器及其制备方法和应用，一种电化学免疫传感器，是以适配体/氨基作为功能化基团制备的Janus粒子，并用其修饰玻碳电极，制备得到的电化学免疫传感器。该方法制备的电化学免疫传感器可用于β‑受体激动剂莱克多巴胺的检测。该方法提高了电化学免疫传感器电极的灵敏度和选择性，使电极修饰过程更加简便，具有良好的稳定性和重现性，并且可以应用于人体尿液中莱克多巴胺的检测。