本发明涉及一种基于氮磷共掺杂生物质基碳量子点，制备步骤如下：将漂白针叶浆和去离子水混合，在疏解机中充分搅拌，使得浆料完全分散，调整浓度，于密封条件下储存于5℃环境下；加入磷酸氢二铵，加入去离子水混合，充分搅拌，然后转移至高温高压反应釜中，反应终止后停止加热，冷却至室温；将所得的液体和固体部分分别取出，过滤除去固体，收集滤液；将滤液进行透析处理，过滤后所得滤液即为碳量子点溶液；经冷冻干燥处理，即得碳量子点固体。本碳量子点光学性能良好，所得碳量子点的荧光强度高，量子产率高，已在多种细胞中成功染色成像，本发明的含氮磷荧光碳量子点可应用于化学、材料、生物医药科学、细胞成像等领域中。