本发明提供一种光固化生物墨水制备方法，包括以下步骤：步骤(1).将巯基化水溶性高分子溶解在水性溶液中形成巯基化水溶性高分子溶液，得到溶液A；步骤(2).将接枝双键的水溶性高分子溶解在水性溶液中形成接枝双键的水溶性高分子溶液，得到溶液B；步骤(3).将A、B两种溶液混合搅拌均匀后，加添加剂以及光引发剂，得到溶液C；步骤(4).将溶液C转移至3D打印机中进行打印，在紫外光源照射下使溶液C固化；本发明所述的巯基化水溶性高分子与双键接枝的水溶性高分子最终形成的水凝胶具有良好的生物相容性，除了通过传统挤出式3D生物打印的方式外，通过DLP或SLA打印的方式能够形成具有复杂结构的组织工程支架，用于科研或医学领域。