本发明公开了一种用于3D生物打印的生物墨水及其制备方法。所述生物墨水包括如下质量百分比的组分：质量分数8％～20％的具有交联功能的亲水性高分子、质量分数10～20％的具有交联功能的水溶性酶、质量分数0.1％～1％的细菌纤维素、余量为无菌PBS溶液。生物打印墨水与细胞混合后即可用于3D打印，所用材料的剪切变稀性能，使得生物墨水挤出后具有自支撑的特点。并且所用材料细胞相容性很好，酶交联剂在生理温度(37℃左右)形成水凝胶，反应条件温和，对细胞无伤害，水凝胶支架在培养液中稳定性较好可以支持细胞增殖。