本公开提供一种经由依次偶联循环来制备寡核苷酸的固相方法，所述方法包括二核苷酸二聚体亚基至少一次偶联于生长链的游离3' ‑端基。所述寡核苷酸包含至少两个通过N3′→P5′磷酰胺酯键联连接的核苷亚基。所述方法可包括以下步骤：(a)使连接于固相支撑物的末端核苷的受保护的3' 氨基脱保护，所述脱保护形成游离3' 氨基；(b)使所述游离3' 氨基与3' ‑受保护的氨基‑二核苷酸‑5' ‑亚磷酰胺二聚体在亲核催化剂存在下接触以形成核苷间N3’→P5’亚磷酰胺键联；以及(c)使所述键联氧化(例如硫化)。通过主题方法产生的组合物可包含降低量的一种或多种(N‑x)寡核苷酸产物。还提供包含主题寡核苷酸组合物的药物组合物。