本公开涉及一种减毒棒状病毒的制备方法及应用。具体来说，本公开提供了一种减毒病毒载体的制备方法，通过上述方法可以制备嵌合表达针对特定靶点的抗体的减毒RNA病毒重组表达载体系统，例如靶向肿瘤微环境的减毒病毒载体系统。前述载体系统可以稳定表达针对特定靶点的相应抗体。本公开的载体的宿主细胞来源广泛，极大的提高了外源嵌合的类抗体的体内外的表达效率；与此同时，载体系统本身的基因组简单且稳定，突变率低，能够快速高效嵌合表达人源的特异性抗体。并且，本公开的载体系统由于进行了基因突变改造，使得病毒的毒性降低，在表达抗体时对宿主的正常细胞不产生明显的损伤。