本发明提出了一种癌类器官的体外培养方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：将癌组织样本进行剪切和消化处理，所述剪切处理后癌组织的大小为1～2mm3，所述消化处理是在组合消化酶的作用下进行的；将消化处理后获得的癌细胞利用预冷基质胶进行重悬处理，所述癌细胞在所述基质胶中的浓度为500～1500/10μL；将癌细胞悬液进行点板处理，并将点板处理后的癌细胞进行培养处理，以便获得癌类器官。根据本发明实施例的方法，提高了癌组织的酶解效率和类器官的传代培养的成功率，能实现类器官长期培养并建立生物样本库。